Transgénesis mediada por espermatozoides en la especie porcina: efecto de la presencia de ADN exógeno sobre la calidad seminal y evaluación de la producción in vivo de embriones transgénicos / Sperm mediated gene transfer in pigs: Effect of exogenous DNA presence in seminal quality and evaluation of in vivo transgenic embryo production

Una alternativa biotecnológica para la producción de animales transgénicos es la transgénesis mediada por espermatozoides (SMGT), basada en la habilidad de las células espermáticas de unir e interiorizar ADN exógeno. En este estudio se plantearon dos objetivos principales: 1) evaluar el efecto de la presencia de ADN exógeno sobre la calidad seminal y 2) evaluar la eficiencia en la producción de embriones transgénicos porcinos in vivo mediante inseminación intrauterina quirúrgica con espermatozoides incubados con el transgén. Para alcanzar estos objetivos, los espermatozoides (libres de plasma seminal) fueron incubados en presencia del transgén EGFP (proteína verde fluorescente) durante 2 h a 16°C (en una relación de 10(8) cels/mL y 5 µg ADN/mL). Se valoró la motilidad, motilidad progresiva e integridad de membrana de los espermatozoides incubados, en presencia o ausencia del transgén. Los resultados mostraron que la presencia del ADN no afectó a ninguno de los parámetros seminales estudiados. Con muestras seminales incubadas con el transgén se llevaron a cabo inseminaciones intrauterinas mediante laparotomía en 4 hembras prepúberes. A los 6-7 días tras la inseminación se recolectaron los embriones, para evaluar la tasa de fecundación y la expresión de la proteína verde fluorescente EGFP en los mismos. El número medio de cuerpos lúteos por cerda fue de 10,50 ± 2,90 con una tasa de recolección de 11,90%. Se recolectó un total de 5 embriones presentando todos ellos un estado normal de desarrollo y una alta calidad (dos de ellos presentaban más de 400 células por embrión). Cuando fue analizada la expresión mediante microscopia de fluorescencia, ninguno de ellos expresaba la proteína EGFP. Este resultado, bajo las condiciones experimentales del presente estudio, podría indicar que el transgén se una en su mayoría a espermatozoides con baja viabilidad por lo que la probabilidad de que los espermatozoides vivos unan el ADN y sean capaces de fecundar en comparación con espermatozoides sin el transgén es realmente baja.

An alternative technology for producing transgenic animals is sperm mediated gene transfer (SMGT), based on the ability of sperm cells to bind and internalize exogenous DNA. The aims of this work were: 1) evaluate the effects of the presence of exogenous DNA in the seminal quality and 2) evaluate the efficiency of transgenic embryos production by surgery artificial insemination using sperm mediated gene transfer technique. Fresh spermatozoa (removed seminal plasma) were incubated with DNA (EGFP) at 16°C for 2 h (10(8) cells/mL and 5 µg DNA/mL). At first motility, progressive motility and viability were evaluated in spermatozoa incubated with or without exogenous DNA. The results showed that the presence of the DNA did not affect any of the studied sperm parameters (motility, progressive motility and viability). On the other hand insemination was carried out in 4 gilts by laparotomy in utero tubaric junction. Six-seven days after insemination blastocysts were collected and fertilization rate and transgene expression were determined. The mean number of corpora lutea/gilt was 10.50 ± 2.90 with a mean recovery rate of 11.90%. After the surgery, a total of 5 embryos were recovered and the percentage of normally developed embryos was 100% and with a high quality (two of them had more than 400 cells). When the blastocysts recovered after 6-7 days post-insemination were analyzed by fluorescence microscopy, it was revealed that none of them expressed protein EGFP. These results show the possibility that exogenous DNA bound to the sperm with low viability and only a low percentage to viable sperm, so the probability that live sperm bind the DNA and are able to fertilize in comparison with live sperm without the transgene are really low.

Modelo experimental para el desarrollo de sinusitis maxilar en conejos / An animal experimental model for maxillary sinusitis

Se acepta la obstrucción de los orificios de drenaje de los senos paranasales trae como consecuencia hipoxia, disminución en el pH, acumulación de secreciones y finalmente infecciones bacterianas. El objetivo de éste estudio fue el de producir de manera experimental la enfermedad inflamatoria sinusual para en un futuro poder estudiar bajo condiciones controladas. Se estuiaron seis conejos obliterándose el ostium de drenaje maxilar con cianocrilato en un solo seno, teniendo al contralateral como control. Después de seis semanas se estudiaron ambas cavidades macro y microscópicamente, así como bacteriológicamente. En todas las cavidades obliteradas se encontró inflamación y edema de mucosas y se cultivaron gérmenes patógenos (Klebsiella en tres, Pseudomonas en dos y estafilococo en una). Nada de esto se observó en los senos maxilares control. Concluimos que la obstrucción en los ostia maxilares favorece la inflamación e infección de la mucosa sinusual y que es posible desarrollar estudios sobre sinusitis bajo condiciones controladas

Comparación del poder diagnóstico de la ultrasonografía transvaginal vs el abordaje sonográfico transabdominal / Comparison of the diagnostic power of the transvaginal ultrasonography vs the transabdominal sonographic approach

Se llevó a cabo un estudio observacional prospectivo con una duración de un año (enero-diciembre 1993) con una muestra de 162 pacientes atendidos en el departamento de sonografía de la Clínica Abreu, en Santo Domingo, República Dominicana, con el diagnóstico presuntivo de alguna entidad ginecológica u obstétrica realizado por su médico referidor, asi como su historia clínica, examen físico y pruebas de laboratorio de lugar. Previo consentimiento se procede a realizarles ultrasonografía transabdominal (TAS) y ultrasonografía transvaginal (TVS) a cada una mediante un equipo de sonografía modelo ULTRAMARK 4 PLUS ATL. El total de 162 pacientes se submuestreó en varios grupos: A 35 pacientes, EP 13 pacientes, EE 16 pacientes, embarazos normales 63 pacientes, enfermedad pélvica inflamatoria 7 pacientes, mioma 26 pacientes, O 37 pacientes y sin patología pélvica 29 pacientes. Hay que destacar que puede haber una superposición de diagnósticos entre los diferentes grupos o sea una mujer con dos o más diagnósticos o posibles diagnósticos. Sin embargo cada diagnóstico era confirmado o descartado por medio del "gold standard" o prueba diagnóstica inequívoca que podría ser: Legrado, laparoscopía, laparotomía, títulos de gonadotropina coriónica humana (b-hCG) o cualitativo, según requiera el caso, por lo que se procede a calcular la sensibilidad (S), especificidad (E), tasa de falsos positivos (FPR), tasa de falsos negativos (FNR), valor predictivo positivo (PVP) y valor predictivo negativo (PVN) de los procedimientos diagnósticos en estudio (TAS y TVS). Los resultados fueron los siguientes: La TVS fue significativamente mejor que la TAS para la S en patología general, EE, PID, M y O y también para EN. La TVS tuvo una tasa significativamente menor que la TAS para la FNR tanto para la patología general así como para EN. La TVS fue significativamente menor que estudios seriados (SER) para la FNR de patología general y EN. La TVS fue mejor que SER para la S de A

Endometriosis pelvica: incidencia y aspectos generales de una consulta privada, 1986-1990 / Pelvic endometriosis : incidence and general aspects of private consult, 1986-1990

Se encontraron 31 casos de endometriosis en el período de estudio, Arrojando una incidencia de 3.8 casos de endometriosis por cada 1000 pacientes por año. La edad de mayor incidencia estuvo entre los 20 y 30 años. Cuarenta y ocho por ciento de las pacientes eran nuligestas, entre estas el 23.8 por ciento tenían diagnóstico de infertilidad primaria. Los síntomas predominantes fueron el dolor pélvico y la dismenorrea. En el examen pélvico la presencia de masa fue el hallazgo más relevante. La endometriosis ovárica fue la más común (74.2 por ciento ), seguida por la uterina y la tubarica

Prevalencia de anticuerpos contra el virus de Epstein Barr en niños de 9ms a 16 años

Se estudia la presencia de anticuerpos para el antígeno capsular del virus de Epstein Barr (VEB) en 100 niños de ambos sexos con edades comprendidas entre 9 meses y 16 años, encontrándose una prevalencia global de 79% con tendencia a aumentar con la edad señalando la temprana infección con el virus aunque con poca expresión clínica de enfermedad. El déficit de agua intradomiciliaria y las transfusiones sanguíneas constituyen los elementos de riesgos más Importantemente identificados